生化分析儀采用一個波長檢測物質的光吸收強度的方式稱為單波長方式。當反應液中含有一種組分，或在混合反應液中待測組分的吸收峰與其它共存物質的吸收波長無重疊時，可以選用。

　　在吸光度檢測中，使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式。當反應液中存在干擾物的較大吸收、從而影響測定結果的準確性時，采用雙波長方式更好。

　　雙波長的作用：雙波長(di-wavelength)測定優點是①消除噪音干擾;②減少雜散光影響;③減少樣品本身光吸收的干擾。從光源，到比色杯、單色器、檢測器的整個光路系統中，均存在著隨時間發生變化的不穩定的檢測信號，即噪音，而雙波長檢測是同時進行的，兩種波長檢測產生的噪音基本上相同，因而能消除噪音干擾。當樣品中存在非化學反應的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時，會產生非特異性的光吸收，而干擾測定結果的準確性。采用雙波長方式測定可以部分消除這類干擾，提高檢測的準確性。

　　次波長的確定方法：當被測物的主波長確定之后，再選擇次波長。如根據甘油三酯等干擾物吸收光譜特征，選擇次波長，使干擾物在主、次波長處有盡可能相同的光吸收值，而被測物在主、次波長處的光吸收值應有較大的差異。一般來說，次波長應大于主波長100nm。以主波長與次波長吸光度差來計算結果。

　　雙波長的具體應用：對于某些反應速度快且無法設置為兩點終點法的分析項目，尤其是單試劑分析中，可以利用雙波長的方式來部分消除樣品本身的光吸收干擾。目前用單試劑法測定的項目應用雙波長的為血清總蛋白（雙縮脲法）主波長500nm，次波長576nm；血清白蛋白（溴甲酚氯法）主、次波長分別為600和700nm；鈣（偶氮砷Ⅲ法）主、次波長分別為660、770nm；磷（紫外比色法）主、次波長為340、405nm，鎂（二甲苯胺藍法）主、次波長為505和600nm。